2×二代高保真快速PCR预混液(含染料)
产品名称: 2×二代高保真快速PCR预混液(含染料)
英文名称: 2×High-Fidelity Fast PCR Master Mix (With Dye)
产品编号: N132016
产品价格: null
产品产地: 美国
品牌商标: Arcegen
更新时间: 2025-05-19T16:40:08
使用范围: null
规格 | 价格 |
250ul | 100.0 |
1ml | 480.0 |
5 × 1 mL | 1600.0 |
- 联系人 : 钟珍
- 地址 : 申江南路4388号1幢2层208室
- 邮编 : 201314
- 所在区域 : 上海
- 电话 : 139****6764 点击查看
- 传真 : 点击查看
- 邮箱 : zhongz@magibagbio.com
- 二维码 : 点击查看
产品简介
本品是即用型2× 预混合溶液,包含AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase,dNTPs以及优化的缓冲体系,预混液中含有预先添加的电泳指示剂,PCR产物可直接进行电泳,扩增产物为平末端。2× High-Fidelity Fast PCR Master Mix (With Dye)具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,反应体系只需加入引物和模板即可。另外,该产品还含有特异保护剂,使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。
产品储存
-25~-15℃保存,有效期1年。
操作注意
1) 为了您的安全和健康,请穿实验服、佩戴口罩、眼罩、一次性手套等采取防护性措施进行实验操作。
2) 本产品仅作科研用途!
操作说明
1. 推荐PCR反应体系
表1 PCR反应体系
组分 |
体积 (μL) |
终浓度 |
2×High-Fidelity Fast PCR Master Mix (With Dye) |
25 |
1× |
模板** |
x |
- |
正向引物F(10 μM)*** |
2 |
0.4 μM |
反向引物R(10 μM) |
2 |
0.4 μM |
ddH2O |
Up to 50 |
- |
【注】:
a. *在1× 预混液含有2 mM Mg2+和200 μM的dNTPs。
b. **推荐范围10-200 ng;cDNA样本上样量范围不超过反应体系的1/10,推荐1-2.5 μL。
c. ***PCR 反应体系中引物终浓度的范围为0.2-1 μM,推荐0.4 μM。
2. 反应程序
表2 PCR反应程序
循环步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 |
预变性 |
98℃ |
30 sec |
1 |
变性 |
98℃ |
10 sec |
30-35 |
退火* |
60℃ |
5 sec |
|
延伸** |
72℃ |
5-10 sec/kb |
|
终延伸 |
72℃ |
2 min |
1 |
【注】:
a. *推荐温度:60°C,也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为5 sec,可以在5-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。
b. **延伸时间:推荐5 sec/kb,也可根据需要,适当延长至10 sec/kb。